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岛津创新:纳米表面分子导向限制性酶解(nSMOL)技术

(发布时间:2017-1-12 9:50:48 点击:55)

  

    对大多数研究团队或制药公司而言,生物基质中单克隆抗体药物的定量分析常常面临着两个棘手的问题:首先是由于样品前处理方法不合适导致的选择性、重复性不佳;其次,若使用LC-MS/MS 进行分析时,会出现耗时或灵敏度不理想的情况。



    岛津公司生命科学研究中心一直致力于开发一类通用型前处理方法,以实现对单克隆抗体药物便捷、高效地分析。蛋白酶解方法是目前常用方法之一,其将单克隆抗体分子水解为多个多肽片段,通过对特征性肽段进行检测,从而实现对抗体药物的定量分析。然而,经该方法酶解得到的多肽片段种类数量众多,组分较复杂, 因此大大减弱了检测灵敏度。为了简化该前处理方法,


    岛津公司推出了一项全新的技术——纳米表面分子导向限制性酶解(nSMOL, nano-Surface and Molecular Orientation Limited Proteolysis)技术,该技术由岛津公司 Takashi Shimada 博士开 发,可用于所有单克隆抗体药物的定量分析。


    nSMOL 技术可在近生理条件下,完成对抗体药物的选择性酶解,并获得与之相应的特征性肽段组分。其工作原理是利用抗体树脂对样品中单克隆抗体药物进行捕获,之后通过蛋白酶纳米颗粒对树脂上抗体成分进行限制性酶解,得到多肽片段。该酶解主要针对抗体的 Fab 区域,Fab 区域外余下部分不受酶解作用且仍保留在原树脂上(如图所示)。因此,nSMOL 技术不仅能够保证获得特异性的抗体序列片段,而且限制性酶解技术大大降低了样品的复杂性,缩短样品前处理时间,提高了检测灵敏度。


 

    针对 LC-MS/MS 分析时出现耗时或灵敏度不理想的情况,岛津公司推出的新一代三重四极杆质谱仪 LCMS-8050 LCMS-8060,实现了灵敏度和速度的创新性突破。其全新的离子导向技术增强了离子聚焦能力和信号响应,30000 u/sec 超快的数据采集速度和 5 msec 极性切换速度,使 LCMS-8050 LCMS-8060 在保证高灵敏度的同时还具有出众的分析速度。因此, LCMS-8050 LCMS-8060 的问世为复杂的生物分析提供了高灵敏度、高稳定性,并缩短了分析时间。


    nSMOL 技术与 LCMS-8050 LCMS-8060 的完美融合,为单克隆抗体药物的定量分析铺平了道路,开拓了视野。基于该技术,岛津公司完成了人血浆中曲妥珠单抗、贝伐珠单抗、利妥昔单抗等单克隆抗体药物的分析,研究成果已在多个国际期刊中发表。


    nSMOL 技术结合岛津三重四极杆质谱仪 LCMS-8050 LCMS-8060 能够较好地解决单克隆抗体药物在定量分析中面临的问题,我们希望该技术能为有关从业人员提供新思路、新方法,也希望该技术能在抗体药物临床前及临床研究中发挥重要作用。


岛津三重四极杆质谱仪 LCMS-8050 LCMS-8060



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