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蛋白质在静电纺丝纤维上的固载与洗脱 |
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资料类型: |
PDF文件
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关键词: |
蛋白质固载 静电纺丝 抗体 抗原 免疫分析 |
资料大小: |
185K |
所属学科: |
分子表征 |
来源: |
2007年全国高分子学术论文报告会(10.9-10.13,成都) |
简介: |
近来人们比较关注蛋白质在静电纺丝纤维上的固载.这种固载蛋白质的纤维体系具有广泛的用途,比如固载酶的催化[1-3]、抗原抗体纯化和受体配体纯化[4]、固载的抗体或者配体作为生物芯片或者生物传感器检测其抗原或者受体[5]等。我们使用生物素化的三嵌段共聚物,聚乙二醇−聚乳酸−聚赖氨酸(PEG-PLA-PLL/biotin)和丙交酯与乙交酯的无规共聚物(PLGA),以质量比1:25混合,通过静电纺丝制备纤维。图1是纺丝纤维的ESEM形貌。在该纤维表面,我们进行了功能蛋白质的固载和洗脱的研究。图2显示固载的原理和步骤。具体步骤是:先将电纺丝纤维制备成滤膜状,作为夹心放入空的滤器支架中,做成器件。然后,将链亲和素、生物素化抗体和抗原的磷酸水缓冲液依次通过滤膜,并控制通过速度,利用生物素和链亲和素之间、抗体和抗原之间特异性相互作用,将上述蛋白质分子固载于纤维上。最后将固载的抗原洗脱,用ELISA测定其抗原活性。为了排除非特异性蛋白质吸附的干扰,在每一步的固载之后,用明胶/PVP/酪蛋白构成的封闭剂溶液对纤维表面进行封闭处理。以上的蛋白质固载和洗脱满足以下要求:(1)选择性和特异性固载;(2)有效而快速;(3)固载蛋白质保留生物活性;(4)对于固载蛋白质可以进行洗脱,并且获得比较高的洗脱效率。图3是固载了荧光标记抗原的纤维。表1是固载蛋白质的定量分析数据。可见目标抗原的固载量为0.27mg/g,洗脱回收率为89%。 |
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作者: |
卢天成 石全 陈学思 景遐斌
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上传时间: |
2007-11-26 16:00:50 |
下载次数: |
487 |
消耗积分: |
2
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立即下载: |
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